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关于荧光滤光片,这篇文章总结的很到位了

点击次数:1133 更新时间:2023-02-09
  荧光滤光片的典型特征是截止深度深,自发荧光小,而且要求透射面形好,利于荧光成像的提取。所以较好的荧光滤光片采用单片无色透明的玻璃作为基底,在玻璃的两个表面镀膜。相比常规的用多片胶合或颜色玻璃辅助截止的荧光滤光片,单片式在荧光成像上有明显优势,但由于单片式的荧光滤光片的制作难度很高,所以成本较高。
 
  荧光滤光片组由以下部件组成:
 
  ·激发滤光片,限制激发光的波长范围;
 
  ·二向色镜分色片,将激发光反射到样品,并将较长波长的发射光传输到探测器;
 
  ·发射滤光片,将发射荧光的有限波长范围传递到探测器。

荧光滤光片

 


 
  在荧光滤光片组中,激发通带位于荧光团的激发光谱之上,而发射通带位于荧光团的发射光谱之上。设置两个通带以获得更佳结果的能力取决于斯托克斯位移,即荧光团的峰值激发波长和峰值发射波长之间的纳米间隔。许多流行的荧光探针具有较小的斯托克斯位移,小于其波长的3%。尽管这些探针的激发和发射通带通常会放在一起,相反,短斯托克斯-位移荧光团的更典型的模式,长波长激发通带边缘和短波长发射通带边缘之间的所谓间隙相对于荧光团的交叉点非常不对称,在该交叉点,归一化的激发和发射曲线交叉。
 
  这种不对称性将发射滤光片通带向外推到更长的波长,结果是发射滤光片捕获的发射光更少,滤光片组性能降低。由于两个原因,间隙很难减小:(1)减小的间隙导致较高水平的激发光通过,即从样品平面反射到发射滤光片中的激发光;(2)制造可变性限制了我们将两个光谱边缘放置在狭窄间隙中的能力,而不会冒着两个滤光片边缘在较深OD处发生交叉的风险。
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