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使用荧光滤光片需要注意哪些

点击次数:1215 更新时间:2023-09-14
  荧光滤光片一般包含三片组合,即激发滤光片、发射滤光片和二色镜。有的系统不带二色镜,这由光路结构决定。有的系统用激光进行激发,不需要激发滤光片。
 
  激发滤光片:在荧光显微镜中,只有激发荧光的波长可通过的滤光片。过去使用的是短波通滤光片,现在基本上都使用带通滤光片。与显微镜的光路呈45°角放置。
 
  在基因表达分析中,荧光滤光片可以用来减少检测样品量,提高检测效率,并增强PCR检测的灵敏度和特异性。它有助于荧光标记物从原始样品中分离出来,以防止影响重复实验中荧光信号检测的不确定因素。
 
  在生物标志物鉴定和基因组等研究中,荧光滤光片也可以通过精准有效地检测出少量的核酸片段,大大提高分子检测的准确性。
 
  荧光滤光片使用须注意:
 
  1、滤光片的顺序不能颠倒,在透射荧光显微镜中,最靠近光源处为吸热滤光片,次之应放置激发滤光片组合,而后为被检标本,最后安放阻挡滤光片。在落射荧光显微镜应用中,在激发滤光片和被检标本之间必须加进色光分离反射滤光片(FT或RKP)。
 
  2、使用滤光片时必须遵守斯托克斯定律,吸热滤光片的透射波长<激发滤光片的透射波长<色光分离反射滤光片的透射波长<阻挡滤光片的透射波长。
 
  3、使用滤光片时必须注意配用滤光片的透射谱线之间愈是相互靠近愈好。
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